上海申安醫(yī)療器械廠淺談對金銀花的滅菌，金銀花有抑菌抗炎，抗氧化等多種生理活性，有清熱解毒、治療熱毒血痢、癰疽疔毒的功效。由于忍冬繁殖能力強(qiáng)，對土壤和氣候的選擇并不嚴(yán)格，全國各地均有種植，目前在大田生產(chǎn)中主要以扦插和分根繁殖為主。由于近年來金銀花價格走勢不斷上升，運(yùn)用范圍不斷拓寬，藥農(nóng)對金銀花的關(guān)注度更是增高。植物組織培養(yǎng)是指在無菌環(huán)境下，利用植物離體的細(xì)胞，組織或器官在人工培養(yǎng)的條件下生成新的植物體的過程。
組織培養(yǎng)能在較短的時間內(nèi)繁殖出大量的植株，有快速、高效的作用。同時，對于金銀花等容易攜帶病毒，易于退化的植物來說，組織培養(yǎng)可以保持其親本的優(yōu)良性狀，維持良好品質(zhì)。在組織培養(yǎng)過程中，面臨的主要問題之一便是外植體的雜菌感染，如何將外植體進(jìn)行有效的滅菌，從而得到大批量無菌苗，應(yīng)用于大田生產(chǎn)，得到量大、價低且品質(zhì)好的金銀花品種是我們一直努力的方向。
由于金銀花外被疏絨毛和疏腺毛，滅菌較為困難。在滅菌劑中加入適量的氫氧化鈉，可增大滅菌劑與金銀花表面的接觸面積，提高滅菌率。在實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)，乙醇濃度低，滅菌時間短都可能造成滅菌不徹底，污染率就相應(yīng)增高，乙醇濃度過高，滅菌時間增長則使外植體褐化率增高，成活率降低，而氫氧化鈉的濃度過高則過分破壞了金銀花表面，使其褐化率增高。處理時間的極差值最高為1.314，為四個因素中最重要因素。本實(shí)驗(yàn)中最適處理時間為30s。實(shí)驗(yàn)五中氫氧化鈉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.0%，處理時間為30s，乙醇的濃度為75.0%，溫度為25℃時外植體污染率和褐化率較低，成活率最高，為最優(yōu)滅菌方法。
金銀花外植體滅菌方式多種多樣，外被疏絨毛、疏腺毛等特征，使得滅菌方法與其他植物相比有所不同。試劑處理后最佳滅菌方式為濃度75.0%乙醇與質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.0%氫氧化鈉混合形成堿化乙醇處理30s加質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%氯化汞處理7min得到污染率5.0%，成活率88.3%的處理方式。考慮到大田生產(chǎn)的成本問題，0.1%的氯化汞處理7min則更為合適。同時，本實(shí)驗(yàn)中最優(yōu)滅菌方法為在含有納米銀的b型培養(yǎng)基上接種經(jīng)無菌水沖洗干凈的外植體，可以達(dá)到98.7%的滅菌率，96.7%的成活率。隨著科技的發(fā)展，試驗(yàn)水平和儀器設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)的提升，無菌處理以及組織培養(yǎng)技術(shù)將會達(dá)到一個更高的水平。
以上內(nèi)容僅供參考。
掃一掃進(jìn)入手機(jī)官網(wǎng)
掃一掃關(guān)注我們
